谈谈层析试剂卡的C线！
在侧向层析检测中，膜上面通常有两条线，一条是T线（Test Line检测线），另一条是C线（Control Line，对照线）。T线我就不用说了，今天就谈谈这条C线。所谓C线，就是控制线，也叫对照线。控制啥呢？最基本的就是控制系统的偏差。如结果在检测中发现C线不显示，说明整个检测系统出了问题，无论T线如何，其检测结果都判定无效。这是最早设定C线的目的。
但是，随着层析产品的发展，有了半定量以及POCT荧光定量的产品，C线又有了新的功能。
通过计算T线和C线的比值（T/C），可以使得定量检测变得更加可靠和灵敏。普遍认为它可以消除因为系统而导致的偏差。
一切听上去都是合乎逻辑，但事实上是这样的吗？我在荧光定量检测中做过大量的验证实验，发现事实上并非如此。
将C线带入拟合计算，其前提是T线和C线包被和结合条件是完全一致的，但实际上二者很难达到一致。
如果单纯包被T线或C线，分别检测线条的信号，发现单纯的划膜包被这个环节，CV就已经很高，即使用最精密的划膜仪。
更要命的是二者的CV还是随机性的。这就会让T/C的偏差变得不可靠。最终，我还是认为将线条的信号做的稳定才是保证产品稳定的前提。
最早设定C线，所用的原料一般都是羊抗鼠IgG的多抗。在一般的定性检测产品，没有什么问题。
但是，如果用于计算的定量产品，这个多抗原料要求就比较高了，因为多抗中的非特异性的东西比较多，最终的信号强度不能保证。
正因为此，有些人就采用一种独立的C线的设计。也就是说，C线与标记的抗体毫无关系，只是提供一个稳定的信号值。
这种独立C线五花八门，有用羊抗兔抗体，有用鸡的IgY，还有用卵清蛋白的等等。尽管如此，到目前为止，在层析产品中，还没有找到一种C线能够彻底地解决检测的偏差。
我曾经做过一个实验，就是用划膜仪在NC膜上划五条相同的T线，结果怎样？
一直到第四条T线，还有很强的信号。这提示我们，在层析过程中，当标记抗体和靶抗原经过T线时，其捕获的动作是瞬间而随机发生的。
就如同一张渔网，不是所有大小的鱼都会被捕获，不会一网打尽。不知道什么原因，很多鱼就穿过去了。
这就是层析检测中的瞬间捕获具有很大的随机性的问题，和膜的流速，表面活性剂以及抗体的亲和力等等都有关系。不像ELISA具有充分的孵育过程保证充分的结合。
所以，层析方法用来定量准确性值得商榷，至少不能和ELISA方法相比。新冠产品的研发，要求与PCR结果相比较，谈何容易！
如果设定一个非独立的C线来控制系统的误差，我思考了好几年的时间也找不到好的模型，有一天看《周易》，突然觉得八卦图是一个好的模型。
T为阳，C为阴，信号此消彼长，两端为圆形，中间是线性。究竟把C线设定在哪个范围可以保证线性关系，不就是我们的目标吗？一旦引入阴阳的概念，就没人敢去质疑了，哲学是最高的学问。
这只是我个人的观点，希望能是引玉之砖。听到同道更多的讨论和观点。
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