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液相色谱质谱联用技术LC-MS/MS的五种扫描模式

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发表于 2020-8-20 15:12:14 | 显示全部楼层 |阅读模式
具有液相色谱LC前端的串联质谱MS,特别是三重四极质谱(也称为“串联”)质谱(LC-MS/MS),这种仪器在过去的十几年里逐渐取代了GC-MS和单四极质谱检测器(LC-MS),成为目前质谱实验中用到的主要仪器之一。
液相色谱质谱联用技术LC-MS/MS仪器包括(i)大气压电离源,通常为ESI源(图1B)或大气压化学电离源(图1C),由(ii)离子入口和聚焦组件(Q0)耦合,提供从大气压到真空的转换和离子聚焦,进入(iii)第一质量过滤装置(Q1),接着进入(iv)碰撞室(Q2),该碰撞室充满用于碰撞诱导离解(CID)的低压气体,接着进入(v)第二质量过滤装置(Q3),最后进入(vi)离子检测器(电子倍增器)(图1A)。
液相色谱质谱联用技术仪可以在仪器灵敏度和质量分辨率范围内进行五种不同的扫描模式:
图片4.png
2:液相色谱质谱联用技术LC-MS/MS的五种扫描模式
1. 全扫描:扫描两个质量过滤器(Q1和Q3)的整个(或部分)质量范围,而Q2不包含任何碰撞气体。此实验可以查看样品中包含的所有离子(图2)。
2. 子离子扫描:在Q1中选择一个特定的m/Q,用碰撞气体填充Q2使所选m/Q碎裂,然后扫描Q3的整个(或部分)质量范围。该实验可以查看所选前体离子的所有碎片/产物离子(图2)。
3. 前体离子扫描:扫描Q1的整个(或部分)质量范围,在Q2中填充碰撞气体,将扫描范围内的所有离子碎片化,然后Q3选择一个特定的m/Q分析。此实验可以通过检测产物离子和检测之前的m/Q的时间相关性,确定哪个m/Q前体离子可能产生所选产物离子(图2)。
4. 中性丢失扫描:在Q1的整个(或部分)质量范围内扫描,用碰撞气体填充Q2使扫描范围内的所有离子碎裂,然后在预定范围内扫描Q3,该预定范围对应前体扫描范围内每个潜在离子发生的特定质量的碎裂引起的损失。该实验可以识别失去选定的通用化学基团的所有前体,例如失去与甲基相对应的质量的所有前体(图2)。
5. 选择(或多个)反应监测(SRM或MRM):在Q1中选择一个特定的m/Q,用碰撞气体填充Q2,将选定的m/Q碎裂,然后Q3从这些片段中选择一个特定的m/Q进行分析。这个实验可以对在Q1中的m/Q的分析物进行特定的检测,已知该m/Q是特定于Q3选择的产物离子的片段。对于这个特定的离子对,检测灵敏度也大大提高,因为检测器现在主要处理这个单一分析物特定的离子对,并且可以在几个周期内重复这样做(图2)。
3类扫描模式常用于方法开发:识别感兴趣分子的前体m/Q(全扫描),确定其裂解的m/Q(产物离子扫描),确认在样品中只有感兴趣分子产生m/Q产物离子(前体离子扫描)。在大多数情况下,一般会选择SRM。对于特定应用,在寻找常见代谢物或相关化合物时,可使用中性丢失扫描,但临床上90%以上会选择SRM。
迪信泰检测平台基于以下液质联用仪(但不仅限于这几种),致力于为各科研院所,高校,药企,生物工程类企业提供高质量、快速、精准的液质联用HPLC-MS、液相串联质谱LC-MS/MS、液相色谱与质谱联用HPLC-MS检测服务
Agilent-6495B三重四极杆LC-MS
Q Exactive TM 质谱联用仪
Micromass Quattro Micro API -LC/MS/MS
AB Triple TOF® 5600+ LC/MS/MS系统
岛津超高效液相色谱仪(LC-30AT)连接SCIEX 5600+ 质谱仪
参考文献:Grebe S K , Singh R J . LC-MS/MS in the Clinical Laboratory – Where to From Here?. Clin Biochem Rev. 2011.
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