medRxiv：评价九种新冠病毒免疫检测试剂，国产胜出

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4月9日，丹麦国立血清研究所（Statens Serum Institut）在medRxiv预印本平台发表研究论文——“Evaluation of nine commercial SARS-CoV-2 immunoassays”（评价九种商用的新冠病毒免疫检测试剂）。

文中展示了丹麦国立血清研究所对丹麦市场上的包括万泰在内的9种商用的新冠病毒抗体试剂的评价结果，包括3种酶联免疫法和6种胶体金法的检测试剂。数据显示，万泰新冠病毒总抗体（Total Ab）检测试剂的灵敏度（93%）、特异性（100%）、阳性预测值（100%）、阴性预测值（98%）均为最高，整体检测性能优于其他被评估试剂，且无交叉反应。

该评价研究选取的30例病例血清样本全部来自丹麦Hillerød医院重症监护病房经核酸检测确诊的新冠肺炎患者（n=30）。
对照血清样本共82例，包括健康献血者存档血清样本（n=10）、其他冠状病毒（n=5）或非冠状病毒（n=45）引起的急性病毒性呼吸道感染患者血清、登革热病毒抗体阳性血清（n=9）、巨细胞病毒（CMV）抗体阳性血清（n=2）、EBV病毒抗体阳性血清（n=10），另有1例CMV和EBV均为抗体阳性的血清样本（n=1）。

结论一：万泰总抗体检测试剂的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值在9种评估试剂中均为最高

数据显示，在9种检测试剂中，万泰总抗体检测试剂的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值均为最高。在3种检测试剂中，除万泰外，另外两个检测试剂来自同一厂家（以下简称对比厂家）。
万泰总抗体检测试剂与对比厂家的IgA抗体检测试剂均为最高的灵敏度（93%），高于对比厂家IgG抗体检测试剂67%的灵敏度；而在特异性方面，万泰总抗体检测试剂特异性为100%，高于对比厂家IgA抗体检测试剂93%的特异性和IgG抗体检测试剂96%的特异性。
在阳性预测值和阴性预测值方面，与对比厂家IgA抗体检测试剂（分别为82% 和97%）和 IgG（分别为87%和89%）相比，万泰总抗体检测试剂的阳性预测值和阴性预测值分别为100%和98%。

结论二：万泰总抗体检测试剂在交叉反应评价中未与其他病毒抗体出现交叉反应

在交叉反应评价中，未发现万泰总抗体检测试剂与测试的非新冠病毒抗体发生交叉反应。而对比厂家的IgA抗体检测试剂与一种以上呼吸道病毒抗体（4/6 [67%]）的血清有交叉反应，并受腺病毒抗体（5/6 [83%]）和登革热病毒抗体影响（表2）。对比厂家的IgG抗体检测试剂与人冠状病毒HKU1抗体阳性的样本和两个腺病毒抗体阳性的样本存在交叉反应。

结论三：ROC分析表明万泰总抗体检测试剂对新冠的诊断价值最大

利用ROC分析评估了不同ELISA试剂盒间的诊断能力（图1B）。结果表明万泰总抗体检测试剂的诊断价值最大，为0.973（95%CI：0.921-1.000），其次是对比厂家的IgA抗体检测试剂和IgG抗体检测试剂，其数值分别为0.954（95%CI：0.897-1.000）和0.887（95%CI：0.810-0.964）。

图1 新冠病毒抗体检测试剂的检测性能

结论四：利用不同病程样本对各检测试剂进行灵敏度评估，结果表明万泰总抗体检测试剂灵敏度优于其他被评估试剂，且针对发病10天后样本的灵敏度稳定在100%

为了评估各检测试剂在新冠肺炎不同病程样本中的灵敏度，该研究将样本按疾病进程分组：早期阶段，发病后7至13天；中期阶段，发病后14至20天；后期阶段，发病后≥21天。各检测试剂的灵敏度范围为早期样本40%-86%、中期样本67%-100%、后期样本78%-89%（图2）。
针对早期阶段样本，万泰总抗体检测试剂的灵敏度为71%，在发病10天后的样本中，灵敏度稳定在100%。对比厂家IgG抗体检测试剂在三个阶段的灵敏度均最低，早期43%，中期67%，后期78%。

图2 各厂家新冠病毒抗体检测试剂的检测性能

在讨论部分，研究人员还对万泰新冠病毒总抗体检测试剂性能表现优异的原因进行了分析。

原因一：万泰新冠病毒抗体检测试剂采用新冠病毒S1亚基的RBD区域作为包被蛋白

对比厂家两种检测试剂均检测针对新冠病毒刺突蛋白S1亚基的特异性IgA抗体或IgG抗体，而万泰检测试剂仅检测针对S1亚基的RBD区域的特异性总抗体（含IgM、IgG、IgA）。RBD区域约占S1亚基的33％，不存在可被该区域外部的交叉反应识别的表位。此外，新冠病毒与其他β-冠状病毒（hCoV-OC43和hCoV-HKU1）之间的RBD差异很大，这可能进一步降低与其他β-冠状病毒发生交叉反应的可能性。

原因二：万泰新冠病毒抗体检测试剂在方法学上采用双抗原夹心法

万泰总抗体检测试剂采用双抗原夹心法，而对比厂家采用间接法。双抗原夹心法可实现双边特异性，而间接法在方法学上易受非特异性抗体影响，从而产生一定的非特异性。

新冠病毒肺炎疫情暴发后，厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心第一时间联合养生堂旗下北京万泰生物药业股份有限公司、厦门万泰凯瑞生物技术有限公司开展应急攻关。在国家科技部应急攻关项目等多方支持下，联合研制出10种新冠病毒检测试剂，获得了1项中国注册证、6项欧盟CE认证、1项澳大利亚ARTG注册证和1项菲律宾FDA认证，有效支持了国内外的抗疫工作。
参考文献：Evaluation of nine commercial SARS-CoV-2 immunoassaysdoi：https://doi.org/10.1101/2020.04.09.20056325