体外诊断试剂产品注册技术审评报告
产品中文名称：幽门螺杆菌抗原检测试剂（乳胶法）产品管理类别：第三类申请人名称：杭州诺辉健康科技有限公司
国家药品监督管理局 医疗器械技术审评中心
基本信息
一、申请人名称杭州诺辉健康科技有限公司二、申请人住所浙江省杭州市滨江区长河街道江二路400号2幢13层1313室三、生产地址杭州市滨江区长河街道江二路400号2幢1层101、102、103、104、105、107、108室；杭州市滨江区长河街道江二路400号1幢1层102室（仓库地址）
技术审评概述
一、产品概述
（一）产品主要组成成分本检测试剂由试纸条、塑料件（管型）、取样棒、样本稀释液组成；试纸上的主要成分有：包被用鼠抗Hp抗体、标记用鼠抗Hp抗体、链霉亲和素、羊抗鼠IgG、生物素、BSA、红乳胶颗粒、硝酸纤维素膜。样本稀释液主要成分：乙二胺四乙酸四钠水合物和氯化钠。（二）产品预期用途幽门螺杆菌抗原检测试剂（乳胶法）用于体外定性检测人粪便样本中幽门螺杆菌抗原。本产品用于幽门螺杆菌感染的辅助诊断，既适用于专业医务人员在医疗单位进行幽门螺杆菌抗原检测，也适用于消费者自测，不建议用于幽门螺杆菌根除治疗后人群进行自测。（三）产品包装规格管型：1人份/盒；管型：2人份/盒（1人份/袋×2）；管型：5人份/盒（1人份/袋×5）。（四）产品检验原理幽门螺杆菌抗原检测试剂（乳胶法）采用双抗体夹心法，试剂含有分别被事先固定于膜上检测区（T）的鼠抗Hp抗体（VacA抗原表位）和质控区（C）的羊抗鼠IgG和链霉亲和素，以及包被在聚酯膜上的乳胶标记鼠抗Hp抗体和乳胶-BSA-生物素偶联物。测试时，液体进入检测槽，随之在毛细效应下向上层析。如样本中含有Hp抗原，首先会和包被在聚酯膜上的乳胶标记鼠抗Hp抗体形成抗原-抗体复合物，进而通过检测区（T）时会被固定在检测区（T）鼠抗Hp抗体所捕获，检测区（T）会出现一条红色条带，判定为阳性。如样本中不含有Hp抗原，则检测区（T）将不会形成双抗夹心复合物，因此检测区（T）内将没有红色条带出现，则判定为阴性。无论Hp抗原是否存在于样本中，乳胶-BSA-生物素在层析过程中会被固定在膜上的链霉亲和素结合，在质控区（C）会出现一条红色条带。质控区（C）内所显现的红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。
二、临床前研究概述
（一）主要原材料1.主要原材料的选择本产品的主要原材料包括：鼠抗幽门螺杆菌单克隆抗体、羊抗鼠IgG多克隆抗体、链霉亲和素、红乳胶颗粒、生物素、硝酸纤维素膜，这些原材料均是通过外购的方式获得。申请人对主要原材料进行了供应商的选择，通过功能性实验筛选出合格供应商，制定了各主要原材料的技术要求和质量标准并经检验合格。2.企业参考品设置情况申请人设计了完整的企业参考品，包括阳性参考品、阴性参考品、精密度参考品和最低检测限参考品。企业参考品由菌液和临床阴性样本制备而成。阳性参考品12份，由6种不同来源的幽门螺杆菌组成，包括不同浓度水平。阴性参考品20份，包括10份特异性菌株和10份临床阴性样本。精密度参考品18份，由6种不同来源的幽门螺杆菌组成，包括阴性、弱阳性和中等阳性水平。最低检测限参考品6份，由6种不同来源的幽门螺杆菌组成。（二）生产工艺及反应体系研究申请人通过对试剂主要生产工艺的研究，确定最佳的生产工艺。对试剂反应体系研究包含样本稀释液装载量、膜条宽度、参与反应的液体量、不同温湿度条件下的检测时间和判读时间、加样量、样本混匀方式等，通过一系列研究，最终确定了最佳的反应体系。（三）分析性能评估本产品分析性能评估内容包括准确度、精密度、分析灵敏度、钩状效应、分析特异性（交叉和干扰）的研究，同时对水样便样本类型的适用性和粪便样本稳定性也进行了研究。申请人提交了有效运行的质量管理体系下生产的三批产品性能评估资料。在准确度性能评估中，申请人使用阴性参考品、阳性参考品进行检测，结果显示检测结果与预期结果阳性符合率和阴性符合率均为100%。使用不同地域临床菌株和临床阳性样本进行检测，结果显示阳性检出率为100%。在精密度性能评估中，申请人使用精密度参考品进行检测，结果显示精密度阴性参考品阴性检出率为100%，精密度弱阳性参考品阳性检出率＞95%，精密度中等阳性参考品阳性检出率为100%。使用精密度参考品（包括精密度阴性参考品1份，精密度弱阳性参考品6份，精密度阳性参考品1份），由四位实验人员在三个实验地点进行20天的检测，同时评估了日内、日间、人员间、批内、批间和地点间精密度，结果显示检测结果符合精密度性能要求，且色带显色强度差异均≤1个档次色差。在分析灵敏度性能评估中，进行了最低检测限的确定和验证。通过对7种不同来源幽门螺杆菌配制成不同浓度的菌液，每个浓度检测20次，确定阳性检出率≥95%的最低浓度水平作为最低检测限，结果显示检测7种幽门螺杆菌时，最低检出限浓度都为3×104CFU/mL。采用三批试剂盒对最低检测限水平不同来源菌液分别重复检测20次，检测结果显示其阳性检出率都≥95%。采用三批试剂盒对于最低检出限蛋白量进行研究，结果表明检测与抗体对应表位的抗原蛋白最低检出限为125ng/mL。在交叉反应的性能评估中，申请人采用14份浓度不高于1×107CFU/mL的特异性菌株（普通变形杆菌、空肠弯曲菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、粪肠球菌、产气肠杆菌、肺炎克雷伯菌、枯草芽孢杆菌、乙酸钙不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形菌、福氏志贺菌和猪霍乱沙门氏菌）分别对三批试剂盒的特异性进行检测，结果显示阴性符合率均为100%，本产品与浓度不高于1×107CFU/mL的14份菌株不发生交叉反应。在干扰物质的性能评估中，使用11份不同浓度的干扰物质（抗坏血酸、脂肪、胆红素、雷尼替丁、奥美拉唑、粘液素、氢氧化钠铝、白细胞、法莫替丁、血红蛋白和枸橼酸铋钾），分别对三批试剂盒的干扰浓度进行研究，结果显示当抗坏血酸＜20mg/dL、粘液素＜2000mg/dL、脂肪＜500mg/mL、氢氧化钠铝＜20mg/g、胆红素＜60mg/dL、白细胞＜10000个/mL、雷尼替丁＜2mg/g、法莫替丁＜2mg/g、奥美拉唑＜2mg/g、血红蛋白＜20mg/g、枸橼酸铋钾＜3mg/g（相当于1.1mg/g铋）时，干扰物质对试剂盒检测结果无明显影响。在钩状效应性能评估中，申请人采用幽门螺杆菌菌悬液进行稀释，每个梯度的稀释液重复3次，绘制钩状效应曲线图，产品信号强度随着幽门螺旋杆菌浓度的先升高后平稳，在平稳期随着幽门螺杆菌浓度的升高却未发现信号强度下降的现象，1×108CFU/mL 幽门螺杆菌浓度是临床上细菌感染水平（106CFU/mL）的100倍时，产品仍未发生钩状效应。结果表明在幽门螺杆菌浓度≤1×108CFU/mL时不会因为产生钩状效应而影响本产品的检测性能，导致假阴性结果的出现。申请人对粪便样本的稳定性进行研究，研究结果表明粪便样本常温可保存6小时；2～8℃下可保存72小时；-25～-15℃冷冻储存可保存6个月，样本最多能反复冻融3次。申请人使用一批次试剂对水样便的适用性进行验证，实验结果表明，水样便类型样本对本产品的检测性能无影响。（四）阳性判断值研究申请人使用临床上诊断明确的200例粪便样本（尿素呼气试验（UBT）阳性94例、阴性106例）对阳性判断值进行研究，通过临界值研究确定本试剂临界值为3×104CFU/mL。研究结果显示，申报产品与UBT结果比对，灵敏度为96.8%，特异性为97.2%，总符合率为97.0%，Kappa值为0.92。使用本试剂盒和已上市同类产品同时对临床样本进行检测，结果表明本试剂与对比试剂和UBT检测结果显示了高度的一致性。经过验证确定阳性判断值为3×104CFU/mL。（五）稳定性研究申请人对本产品的稳定性研究包括货架效期稳定性、开封稳定性、运输稳定性，确定了各种条件下本产品的有效保存时间，所用试剂批号为 201804001、201804002、201805001。货架效期稳定性：采用三批试剂进行研究，试剂保存在 2～30℃条件下，分别于保存第0个月、3个月、6个月、9个月、12个月、13个月时取出试剂盒，对试剂盒的阴阳符合率、精密度、最低检测限进行考察，各项性能指标均符合要求，但在19～30℃条件下实际保存250天，综合考虑，确定产品在2～25℃储存条件下，可稳定保存8个月。开封稳定性：随机抽取三批试剂，设置恒温恒湿箱的温度为30℃、湿度为90%，打开试剂铝箔袋，放入恒温恒湿箱保存分别在铝箔袋打开1h和1.5h时取出，对试剂盒的阴阳符合率、精密度、最低检测限进行考察，各项性能指标均符合要求，确定试剂盒铝箔袋打开后，在温度15～30℃、湿度20%～90%的环境下，可保存1个小时。
三、临床评价概述
申请人在浙江大学医学院附属邵逸夫医院、浙江省人民医院和北京大学首钢医院共三家临床机构开展临床试验，从以下三方面对产品临床性能进行评价：1.采用试验体外诊断试剂与已上市同类产品进行对比试验。入组病例包括有胃炎、消化性溃疡、消化不良等胃部疾病症状人群，以及部分无相关症状但临床怀疑幽门螺杆菌感染的人群，样本类型为粪便样本。临床试验共入组受试者1644例，其中幽门螺杆菌抗原阳性样本580例，阴性样本1064例。试验结果显示，试验体外诊断试剂与对比试剂阳性符合率为 98.97%（95%CI：97.76%，99.62%），阴性符合率为99.53%（95%CI：98.91%，99.85%），总符合率为99.33%（95%CI：98.81%，99.67%）。两种方法检测不一致的样本采用其他已上市同类产品进行验证，结合验证结果，对不一致结果产生的原因进行了详细分析。2.采用试验体外诊断试剂与临床参考标准尿素呼气试验（UBT）进行比较研究。入组病例包括有胃炎、消化性溃疡、消化不良等胃部疾病症状人群，以及部分无相关症状但临床怀疑幽门螺杆菌感染的人群，样本类型为粪便样本。临床试验共入组受试者744例，UBT阳性样本288例，UBT阴性样本456例。试验结果显示，试验体外诊断试剂与呼气试验对比，临床灵敏度为96.53%（95%CI：93.71%，98.32%），临床特异度为99.12%（95%CI：97.77%，99.76%）。3.针对消费者自测用途，申请人完成了无医学背景消费者与专业检测人员采用试验体外诊断试剂检测自采集样本的对比试验，以及无医学背景消费者对说明书的认知能力评价。入组病例包括有胃炎、消化性溃疡、消化不良等胃部疾病症状人群，以及部分无相关症状但临床怀疑幽门螺杆菌感染的人群（均为初诊患者，无幽门螺杆菌根除术后患者），样本类型为粪便样本。临床试验共入组受试者710例，其中幽门螺杆菌抗原阳性样本275例，阴性样本435例。试验结果显示，无医学背景消费者与专业检测人员检测结果阳性符合率为100%（95%CI：98.62%，100%），阴性符合率为100%（95%CI：99.12%，100%），总符合率为100%（95%CI：98.46%，100%）。无医学背景检测人员检测成功率为100%。参与说明书认知能力评价并返回有效问卷的受试者共561例，包括不同年龄段、不同教育背景人群。问卷中调查问题包括受试者对产品适用人群、适用样本类型的理解、对说明书中注意事项、检验方法局限性、检验结果解释的理解，以及检测过程中所有步骤及条件的理解等，问卷评价根据不同问题对检测结果的影响以及风险程度设置不同分值，评价结果显示参加评价的受试者平均分值98.1分（满分100分），各项题目平均正确率96%，关键问题错误率均低于5%，问卷调查中对产品的总体评价为“好”及以上的占比100%。不同年龄段人群、不同教育背景人群均能够正确理解说明书。申请人根据问卷调查中发现的问题对产品说明书进行了进一步完善，包括重点内容及易被忽视内容加粗标记或进行特殊标记，操作图示采用彩色印刷等。综上所述，该产品临床试验设计符合《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》和《幽门螺杆菌抗原抗体检测试剂注册技术审查指导原则》的相关要求。临床试验结果显示该产品临床性能能够满足临床需求，且无医学背景消费者能够正确理解说明书并正确使用产品进行检测和判读。
四、产品受益风险判定
根据申请人提供的申报资料，经综合评价，在目前认知水平上，认为该产品的上市为适用人群带来的受益大于风险。但为保证用械安全，基于对主要剩余风险的规避，需要在说明书中提示以下信息：1.本产品用于幽门螺杆菌感染的辅助诊断，既适用于专业医务人员在医疗单位进行幽门螺杆菌抗原检测，也适用于消费者自测，不建议用于幽门螺杆菌根除治疗后人群进行自测。2.阴性结果不能完全排除感染的可能，必要时建议去医院进一步检查。3.不建议年龄小于14岁或大于70岁人群在没有医嘱条件下自行购买本产品进行自测。4.检测完成后严禁依据检测结果自行服药。
综合评价意见
本申报项目为境内第三类体外诊断试剂产品注册，属于境内同品种首个产品。申请人的注册申报资料符合现行要求，依据《医疗器械监督管理条例》（国务院令第680号）、《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令2014年第5号）等相关医疗器械法规与配套规章，经系统评价后，建议准予注册。2021年12月24日------------------------------------------------------------------------------
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发表于 2022-1-8 22:10:37
