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羧基时间分辨荧光微球推荐应用方案

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发表于 2023-5-30 17:20:13 | 显示全部楼层 |阅读模式
1. 取50 μL微球(固含量1%)原液加入到含1mL偶联缓冲液(50 mM MES,pH6.0)的离心管中,超声混匀;
2. 加入现配EDC(10 mg/mL)、NHS(10 mg/mL)各10μL,涡旋混匀;
3. 将离心管置于转盘上,室温、避光活化30min;
4. 15℃、15000 rpm,离心20 min,弃上清;
5. 加入偶联缓冲液1 mL(或其他标记缓冲液),超声混匀;
6. 加入待偶联抗体50 μg,涡旋混匀,将离心管置于转盘上,室温、避光偶联2 h;
7. 加入微球封闭液(20 mM硼酸缓冲液pH 8.0 、1% BSA、0.2%乙醇胺)500 μL涡旋混匀,将离心管至于转盘上,室温、避光封闭1h;
8. 15℃、15000 rpm,离心20 min,弃上清;
9. 加入500 μL微球保存液,超声分散均匀,2-8℃避光保存备用。

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