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不同病理方法学检测幽门螺杆菌对比分析

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发表于 2023-9-10 14:21:47 | 显示全部楼层 |阅读模式
来源: 摘录自中华医学会消化内镜学分会病理学组.胃黏膜幽门螺杆菌感染病理组织学专家共识[J].中华消化内镜杂志, 2023, 40(8): 589-594.

来源:CACLP体外诊断资讯



临床上,胃镜检查已经成为胃肠道疾病诊断的常规手段,取出的活检组织会送病理科出具相应的病理报告,病理学方法检测HP结果更为精准。2023年9月,《胃黏膜幽门螺杆菌感染病理组织学专家共识》发布,病理学不同检测方法的差异要点如下:

1
苏木素-伊红(HE)染色:HE染色是病理诊断中首选的常用方法之一,但该染色中HP菌体和背景均呈蓝紫色,肉眼难以区分,检出的菌体数较少,导致检测HP的敏感度和特异度均不高,敏感度为60%~80%,特异度约75%;另外,受质子泵抑制剂等药物影响,HP可转化成球状形式,导致HE染色无法检测出,易造成假阴性现象,据统计,HE染色导致的假阳性和假阴性可达19%。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)
2
吉姆萨(Giemsa)染色:Giemsa染色的背景颜色和待检测的HP颜色一致,对比度差,当标本中HP含量很少时,很难被检测出。并且Giemsa染色无法区分球状HP和其他球菌,易导致假阴性结果。此外,传统Giemsa染色检测费用高,耗时长。改良Giemsa染色,虽然染色时间缩短,但仍受炎症程度、菌体密度和菌体活跃程度的影响较大。研究发现Giemsa染色的敏感度跨度较大,当HP菌体较活跃时Giemsa染色的敏感度可达60%~83%,当菌体活跃度下降时其敏感度可降低至33.6%。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)
3
银染:银染检测中,附着在菌体上的银染颗粒呈棕黑色,背景呈棕褐色,较易区分,但常因银染颗粒太多,与菌体混在一起,造成假阳性结果。研究显示,银染检测HP的假阳性率约为6.9%。此外,银染还存在配制染色液繁琐、需要严格把控染色时间、染色过程中需要使用水浴箱、染色时间较长以及试剂不稳定等缺点。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)
4
甲苯胺蓝染色:甲苯胺蓝染色中HP和背景均呈蓝色,肉眼难以区分,需在高倍镜下仔细辨认,检测出的菌体数较少。研究显示,该方法检测HP的敏感度约80%,但由于可同时染色其他革兰阴性菌,因此特异度较差。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)
5
免疫组化染色:免疫组化染色是通过HP的特异性抗体检测组织当中的HP分布,该方法中,着色菌体与组织色差明显,即使在低倍镜下观察,也可见棕褐色阳性信号,且不受菌体活跃度和球形变的影响。多项研究表明,免疫组化染色的特异度、灵敏度及准确率均高于HE、Giemsa、银染和甲苯胺蓝染色,均可达98 %以上。2 896例胃活检的单中心诊断结果评估显示,免疫组化染色较Giemsa染色阳性率更高(27.5%比23.7%),这意味着免疫组化染色敏感度更高,可以提高诊断准确率。与常规HE和改良Giemsa染色相比,免疫组化染色在极少菌体感染的情况下能够准确检测出HP的存在。此外,由于在常规HE切片上,即可有效区分HP与Hh,免疫组化染色的应用,在提高诊断准确率的同时,并不会带来新的误判。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)
6
免疫荧光染色:免疫荧光染色采用抗原与抗体结合荧光染料定位检测HP,与免疫组化染色具有很好的一致性,有高敏感度与特异度,并可使用该方法检测克拉霉素耐药性。但该检测方法非特异性着色的问题尚未解决,同时需在暗室用荧光显微镜观察,且无法长期保存标本。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)
7
PCR-荧光探针法:PCR-荧光探针法检测HP具有简单、准确、快速、自动化、高效等优点,准确的引物设计和正确的基因选择是qPCR反应成功的关键。但其无法与组织形态学相结合,且可能存在敏感度过高的现象。结果的准确性很大程度上还取决于实验人员的操作、仪器、反应试剂和分析数据所用软件的选择。此外,qPCR还存在较多不便之处,如使用的材料在提取DNA前要超低温保存和运输、原材料不能长期保存、微生物DNA提取试剂盒费用昂贵、提取的DNA保存不当会影响实验结果等。(证据等级:B;推荐强度:强;共识水平:100%)

不同病理方法学检测HP对比分析见表1。
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