Alexa Fluor系列生物标记荧光染料

长沙瀚辰生物

1 Alexa Fluor系列染料概述

Alexa Fluor（AF）是美国分子探针公司（Molecular Probes，Inc）开发的系列荧光染料，通过磺酸化香豆素、氧杂蔥、花菁类合成。磺酸酯基团的引入使得Alexa染料呈负电性和亲水性，具有更好的光学稳定性、发光强度以及pH的适应性，可以胜任蛋白标记等各种要求较高的生物标记实验。

Fig. 1 图示部分Alexa Fluor染料结构

Alexa Fluor系列染料，其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域，对绝大多数荧光显微镜都适用。根据不同的最佳激光扫描光谱，Alexa Fluor系列染料可分为几种不同的类型，具体如下表。

Table 1 Alexa Fluor系列染料光学特性

参考资料：公开资料整理；中国生物工程杂志. 2015

2 Alexa Fluor系列染料标记方式

生物偶联试剂最重要的特征是其化学反应基团，它是化学修饰方法和机制建立的基础。常见的用作生物偶联靶标（生物大分子）的功能基团包括伯胺、巯基、羰基、碳水化合物以及羧酸，根据功能基团的种类不同，需选择对应化学反应性基团的荧光染料。各类化学反应性基团与生物靶标功能基团的对应关系及反应类别如下表。

Table 2 反应性基团与靶标功能基团对应表

作为荧光探针，Alexa Fluor染料的活性基团与生物分子中的特定位点相偶联形成稳定结构，从而实现对蛋白质、核酸等生物分子的Alexa Fluor荧光标记。长沙瀚辰生物科技有限公司可提供多种Alexa Fluor荧光染料，涵盖不同波段，可适用于不同检测通道，满足您更加精细的实验需求。

3 Alexa Fluor系列染料的优点

对于荧光探针，好的光稳定性是灵敏度高、特异性强的基础。相较于传统有机荧光染料，Alexa Fluor系列染料具有以下优势。

①发射光谱窄。

相较于传统有机荧光染料，Alexa Fluor染料具有较窄的发射光谱，从而降低不同检测的交叉水平。

②荧光强度强，光稳定性好。

通过对Alexa Fluor、荧光素、罗丹明6G、四甲基罗丹明和Cy3等染料标记羊抗鼠抗血清、链霉亲和素等生物分子的荧光信号强度进行对比分析发现，尽管这些染料具有与Alexa Fluor染料类似的发射和激发光谱，但在各染料的吸收和发射光谱范围内Alexa Fluor染料量子产率更高、荧光强度更强、光稳定性更好。

③受温度和pH的影响较小。

研究发现Alexa Fluor标记细菌，在100℃高温下染料仍可保持稳定性12h以上，可用于原位分析研究。另外，对Alexa Fluor染料的发射光谱、吸收光谱和荧光信号强度进行研究，证明Alexa Fluor染料对pH变化不敏感，可在pH为4~10时保持稳定结构和强荧光。

④具有良好的水溶性。

无需有机试剂Alexa Fluor染料即可结合蛋白质，且储存不易产生沉淀。在简单缓冲溶液中Alexa Fluor染料表现出很少的衰落。

⑤可通过标记，对不同对象进行区分。

Alexa Fluor系列染料具有不同的颜色，可根据实验需要，用不同Alexa Fluor染料标记不同的对象，从而实现区分。

⑥价格实惠，使用方便。

随着Alexa Fluor染料在医学和农业领域的广泛应用使其商业生产得到了基本普及，价格实惠；其标记产品的生产降低了实验的复杂程度。

4 Alexa Fluor系列染料用途

Alexa Fluor系列染料可用于单分子检测、荧光标记、细胞生物学、生物物理过程等生物科学研究的各个方面，用途较为广泛。

5 相关目录

长沙瀚辰生物科技有限公司提供各类荧光染料、生物素、地高辛标记物，依据用户需求，可自主选择带不同反应基团的标记物，如NHS、Maleimide、Carboxylic acid等，实现对抗体、多肽以及核酸探针等的标记。

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